革兰氏阴性多药耐药现已被认为是一个引起全世界关注的问题。这些细菌具有各种耐药机制，损害了几种抗生素的功效，如β -内酰胺类和氨基糖苷类。因此，有必要开发有效的工具，如筛选培养基，以快速检测氨基糖苷耐药细菌在人类和动物分离株中的潜在传播。这种媒介允许进行前瞻性筛查和流行病学调查，以确保氨基糖苷类药物的使用。

氨基糖苷类耐药的主要机制依赖于酶的产生，这些酶要么修饰抗生素本身，要么修饰抗生素的靶标。核苷酸转移酶(ANT)、磷酸转移酶(APH)和乙酰转移酶(AAC)只改变特定氨基苷的结构，但不是全部。它们通常是质粒编码的，可能与氨基糖苷类的泛药耐药有关，但这是一种例外现象。然而，16S rRNA甲基化酶通过甲基化16S rRNA来修饰氨基糖苷的靶标，从而赋予氨基糖苷的泛药抗性，这与许多碳青霉烯酶产生物(如NDM产生物)有关。这种甲基化使得除了新霉素和阿维帕素外，还对广泛使用的氨基糖苷类具有耐药性，如庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、异帕霉素、卡那霉素和奈替米星(图1)。因此，开发了一种培养基来筛选对氨基糖苷类的泛药耐药性。

图1所示。产生16S rRNA甲基化酶的肺炎克雷伯菌菌株(AKN -阿米卡星，GMI -庆大霉素，KMN -卡那霉素，TMN -托布霉素)的抗生素图谱。16S rRNA甲基化酶的一个指标是氨基糖苷抗生素盘周围的幻影区。

培养基的基础是eosine -亚甲基蓝(EMB)琼脂，它允许乳糖发酵菌(黑色菌落)与大多数非发酵菌(无色或淡紫色)的分化(图2)。万古霉素和两性霉素B分别用于防止革兰氏阳性细菌和真菌的生长。考虑到16S rRNA甲基化酶产生者同时对阿米卡星和庆大霉素耐药，我们将这两种抗生素加入培养基中，以选择对氨基糖苷具有全耐药的特异性细菌。

关于接种量，临界值设为10^3.CFU /毫升。事实上，高剂量的易感菌株或产生氨基糖苷修饰酶的分离物可能导致少数菌落的生长。因此，将100µl生理盐水中的细菌悬浮液镀在SuperAminoglycoside培养基上。然后，在37°C下孵育18小时。如果没有观察到生长，则将孵育延长至48小时，以确认没有实际发生生长。

图2所示。产生16S rRNA甲基化酶的肺炎克雷伯菌在超氨基糖苷培养基上生长。

为了评价超氨基糖苷培养基的性能，69株不同种类(肠杆菌科，铜绿假单胞菌,答:baumannii)在这项研究中进行了测试。12株对氨基糖苷敏感，57株耐药。20株产生16S rRNA甲基化酶，37株产生氨基糖苷修饰酶。根据菌株对阿米卡星和庆大霉素的MIC(用阳离子调节Mueller-Hinton肉汤微量稀释法测定)分为耐药和敏感菌株。

superaminglycocoside培养基筛选产生16S rRNA甲基化酶的耐阿米卡星和庆大霉素菌株的敏感性和特异性分别为95%(19/20)和96%(47/49)。当只考虑对阿米卡星和庆大霉素耐药菌株的检测时(不考虑16S rRNA甲基化酶的产生)，培养基的特异性为100%。

superaminglycoside培养基有助于根据培养基上生长的菌落颜色进行物种鉴定(图2)。它可以快速鉴定产生质粒介导的16S rRNA甲基化酶的分离株，从而能够实施快速感染控制措施，以限制抗性质粒的传播。

帕特里斯高加索^{1、2、3、4}，卡米尔Tinguely^1、2，Laurent Poirel^1、2、3
1香港中文大学理学院医学系医学及分子微生物组
弗里堡大学，弗里堡，瑞士
²INSERM欧洲单位(LEA, IAME，法国)，弗里堡大学，弗里堡，瑞士
^3.瑞士国家新兴抗生素耐药性参考中心(NARA)，弗里堡，瑞士
⁴瑞士洛桑大学微生物研究所和洛桑大学医院中心

出版

筛选产生16S rRNA甲基化酶的泛氨基糖苷耐革兰氏阴性菌的培养基。
李建军，李建军，李建军，李建军，李建军
诊断微生物与感染杂志2018年6月

离线阅读:

相关文章:

	碳青霉烯抗性肠杆菌科:对抗突变体当引起感染的细菌在暴露于正常情况下会杀死或抑制其生长的药物后存活时，就会出现抗生素耐药性。因此，这个……
	抗多药耐药新策略由于目前世界范围内的抗生素耐药性，迫切需要找到能够处理多重耐药病原体的新的替代抗菌方法。事实上，世界卫生组织…
	细菌的抗生素耐受性:如何恢复…细菌利用大量的机制来逃避抗生素的杀死。耐药性是文献记载最充分的机制。在这里，细菌DNA的遗传变化导致抗生素不敏感。作为一个…
	狗和人的弯曲杆菌抗菌素耐药性自2005年以来，弯曲杆菌病一直是欧洲最常见的人畜共患疾病，近年来，许多欧洲国家每年报告的弯曲杆菌病病例数有所增加。
	生物id筛选细菌毒力蛋白:新工具…20世纪20年代青霉素的发现彻底改变了我们治疗细菌感染的能力。然而，尽管引入了抗生素，传染性细菌病原体仍然是医疗保健的巨大挑战。
	快速监测多种微生物感染的影响……细菌感染的发展是一项重大挑战，因为致病菌在医疗机构中传播，患者可能接触到在医院大量定植的复杂细菌群落。