d -氨基酸具有不同于l-氨基酸的重要生物学功能，近年来在医学、临床和食品工业等各个研究领域受到广泛关注;官方manbetx手机版因此，越来越需要开发快速、可靠和高灵敏度的方法来分离和定量这两种氨基酸构型。

大多数手性氨基酸分离技术需要复杂的衍生化过程，以达到理想的色谱行为和可检测性。本文介绍了一种不需要衍生化过程的高灵敏度手性氨基酸对映体分离的液相色谱-四极杆质谱分析方法。

图1所示。

之前，我们开发了一种同时分析18种手性蛋白质原氨基酸的分析方法，使用手性冠醚柱和液相色谱-飞行时间质谱(LC-TOFMS)的组合(见:d -氨基酸分析的技术革命)。该方法能够在短时间内保持良好的峰分辨率的同时，实现氨基酸的基线对映体分离。此外，该方法不需要衍生化步骤，因此可以避免衍生化过程中可能发生的不良问题。然而，该方法是基于高端TOFMS系统的精确质量测量构建的，这阻碍了其通用性和可用性。与TOFMS相比，QqQMS在提供定量数据方面被广泛认为是一种强大而通用的分析工具。qqms中的多反应监测(MRM)模式采用两级质量过滤，可去除杂质离子，实现了对痕量目标化合物的高灵敏度和选择性检测。

LC-QqQMS方法可同时分析18种d-氨基酸，灵敏度高(检出限为5pmol /mL ~ 500pmol /mL)，重复性好(各峰区的RSD均为20%)。用R值验证了各稀释曲线在大范围内的线性关系²值> 0.99，表明数据具有良好的相关性，该系统能够定量手性氨基酸的浓度。该方法可用于食品中微量d-氨基酸的定量分析。先前，我们证明了14种D-氨基酸，即D- ala, D- ser, D- val, D- thr, D-紧密相联的-Ile、D-Leu、D-Asn、D-Glu、D-Met、D-His、D-Phe、D-Arg、D-Tyr和D-Lys可在食醋中检测到。

最近，我们开发了一种综合分析115种手性和非手性代谢物的方法，使用两种类型的手性色谱柱(以双萘基冠醚和金鸡纳生物碱衍生的两性离子固定相)。这种方法的目标胺，如非蛋白质氨基酸(如。GABA和鸟氨酸)、核酸代谢物(如。腺嘌呤和鸟嘌呤)和生物活性化合物(如。多巴和血清素)以及蛋白质生成氨基酸。我们预计这些方法将使先进的分析为发现分子标记提供新的见解，这些标记应用于各个领域，特别是食品分析。

Yosuke Nakano¹，Eiichiro Fukusaki^2
1旭质创新有限公司
²日本大阪大学工学研究生院生物技术系

出版

无衍生性手性氨基酸分析的高通量LC-MS/MS方法
中野洋介，谷口摩裕，Umakoshi，渡台大辅，福崎荣一郎
方法Mol Biol. 2019

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