无机汞与特定脂类的优先结合及其与镉的竞争
汞是一种具有公认毒性的重金属,在环境中以多种形式存在,包括元素汞、有机汞和无机汞(Hg),这是本研究感兴趣的金属形式。除了对神经系统和排泄系统产生毒性作用外,汞还对心血管系统产生不利影响。无机镉(Cd)也是一种有毒的重金属污染物,由于工业化而在环境中积累。
由于这些金属对健康的重大影响,需要更好地了解金属对生物膜中潜在目标的诱导作用,而对金属-脂质相互作用的了解要少得多。汞和镉受离子强度的影响很大,因为氯离子会引起溶液中金属种类的变化。与Cd相比,Hg对氯化物的亲和力更高,导致形成主要中性和带负电荷的络合物,包括HgCl2, HgCl3.-和hcl42 -而Cd则主要形成带正电的配合物(Cd2 +和CdCl+).因此,本研究的目的是在生理相关的氯离子和pH条件(100 mM NaCl pH 7.4)下,筛选Hg和Cd与中性、负电和带正电的脂质的相互作用。这种化学形态的差异预计会影响静电驱动的金属-脂质相互作用,因为Cd会与带负电的脂质相互作用,而Hg预计会与带正电的脂质相互作用。
实验还集中在Hg-plasmalogen相互作用,导致脂质分裂成两个片段。缩醛原在大脑、心脏和红细胞膜中富集,它们的消耗与阿尔茨海默氏症、唐氏综合症和齐薇格综合症有关。虽然从文献中已知Hg-plasmalogen相互作用,但其对脂质膜大小和流动性的影响尚不清楚。
为了研究金属-脂质相互作用,多层脂质结构通过孔径确定的过滤器,产生直径约100 nm的单层大单层囊泡(LUVs)。接下来,我们利用荧光分子Laurdan将其整合到luv中并作为极性传感器。在紧密排列的凝胶相双层中,Laurdan在440 nm处发出更多的荧光,在那里它不太容易被水接触到,而在490 nm处,在排列不太紧密的液晶相中观察到荧光增加。这些荧光强度的变化与膜的流动性有关,并使用广义极化(GP)方程进行了量化。
利用GP监测流动性随温度的变化,并研究Hg和Cd对不同模拟髓磷脂脂质模型流动性的影响(脂质结构见图1)。
然后用动态光散射测量在不存在Hg和Cd的情况下luv的平均尺寸。
我们的研究结果表明,汞靶向所有含质磷脂的脂质系统,诱导膜刚性/更紧密的包装。量热数据表明,汞与等离子原结合,解离常数在4-30µM之间。负汞还能靶向带正电的脂质,诱导luv的刚性和聚集。有趣的是,当等离子原汞靶与负Cd脂质靶同时存在时,结果强烈依赖于金属的存在和金属添加到膜上的顺序。虽然汞诱导的磷脂原分解也导致LUV结构的破坏,但镉与负脂质的相互作用导致聚集。然而,当首先将汞添加到质脲原/阴性脂质LUV中时,Cd诱导的聚集被阻断,而如果首先添加Cd, Hg诱导的LUV分解被阻断(图2)。这些数据表明,脂质特异性金属诱导对膜结构和功能有显著影响,为了更好地了解它们的毒理学,应该考虑这些影响。
埃文Kerek1,穆罕默德Hassanin2,温州张3.,埃尔玛·J·普伦纳2
1加拿大阿尔伯塔大学药学系,加拿大埃德蒙顿,t6g2h7
2加拿大卡尔加里大学生物科学系,加拿大阿尔伯塔省卡尔加里t2n1n4
3.加拿大麦吉尔大学化学系,加拿大montracei, H3A 0B8
出版
无机汞与特定脂类的优先结合及其与镉的竞争。
张伟,李建军,李建军,等
生物化学学报,2017年7月
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