膜间空间桥接成分的亚线粒体图谱

我们的工作报告一般适用于生物界的工具,现在允许研究人员解决生物医学研究中最常见的问题之一,“是什么与感兴趣的分子或细胞器相互作用或接近?”官方manbetx手机版蛋白质工程和化学合成被用来创造一套工具,突破细胞中蛋白质成像的界限。介绍了MiniSOG和APEX2作为电子显微镜的遗传编码标签。它们揭示了特定标记蛋白质的纳米级定位,现在可以用于接近蛋白质组学。由独特的TxBR软件驱动的高分辨率成像技术首次绘制了miniSOG和apex2标记的线粒体膜间空间桥接(MIB)蛋白的亚线粒体三维位置。

图1所示。左图:HL-1细胞层析体积中心的1 nm切片,显示Mic19-miniSOG标记(深色染色)部分排列在嵴内部。中间:线粒体的分割和表面呈现的体积。线粒体外膜呈绿色,嵴呈各种颜色。HL-1细胞密集排列着嵴。右图:相同方向,但显示嵴内mic19阳性结构域(绿色)(半透明品红色)。

鉴于其在线粒体组织中的新兴作用,MIB的组成和功能一直是及时和多产的研究方向。也许大型MIB复合体中最重要的成分是Mic60(也称为有丝分裂蛋白),它位于线粒体内膜,Mic19(也称为ChChd3),它被束缚在线粒体膜间隙中,以及Sam50,它位于线粒体外膜中。我们工作的关键概念进展是破译Mic19, Mic60和Sam50在结构标志环境中的亚区室位置,如嵴和嵴连接(CJs)。

关键结果

  • 标记Mic19(图1)和Mic60(图2)位于所有CJs中,沿线粒体外周呈网状分布,也富集于嵴内。
  • Mic19和Mic60标记区不填满嵴体积;MIc19区域呈一个离散的形状,但mic60阳性结构域有几个较小的形状,分布在整个嵴体积中,其填充程度与MIc19不同。
  • Mic19与细胞色素c氧化酶亚基IV相关。
  • 标记的Sam50在线粒体外膜不均匀分布,似乎与Mic19或mic60阳性结构域不完全重叠,最明显的是在CJs。

图2所示。左图:人类原代星形胶质细胞1 nm的断层扫描切片,显示嵴内Mic60-APEX2标记的斑块。中间:线粒体的分割和表面呈现的体积。线粒体外膜呈绿色,嵴呈各种颜色。右图:相同的方向,但显示嵴内(半透明蓝色)的mic60阳性结构域(绿色)的3D斑块模式。

这些发现有助于确定MIB的生理功能和相互作用伙伴。

米拉Sastri1Manjula Darshi2梅森麦基3.野生动物拉马3.马克·h·埃利斯曼3.
苏珊·s·泰勒1、2、4盖·a·帕金斯3.

1美国加州大学圣迭戈分校化学与生物化学系
2霍华德休斯医学研究所,加州大学,圣地亚哥,加州,美国
3.美国加州大学圣地亚哥分校国家显微与成像研究中心官方manbetx手机版
4美国加州大学圣地亚哥分校药学系

出版

遗传标记线粒体膜间空间桥接成分Mic19、Mic60和Sam50的亚线粒体定位。
Sastri M, Darshi M, Mackey M, Ramachandra R, Ju S, Phan S, Adams S, Stein K, Douglas CR, Kim JJ, Ellisman MH, Taylor SS, Perkins GA
细胞科学,2017年10月1日

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