我们的研官方manbetx手机版究提出了一种新的、位点特异性的方法来标记各种应用的分子抗体，改进了传统的抗体偶联方法。该方法具有广泛的兼容性和模块化，使实验室能够快速标记其抗体以提高分析性能。

抗体是高度特异性的y形蛋白质，可作为研究、诊断和治疗应用的多功能工具。官方manbetx手机版抗体的两条臂能够寻找并结合细胞和分子靶标。官方manbetx手机版研究人员长期以来一直利用抗体的特异性结合能力来实现各种目的。例如，抗体可以被标记为货物，如药物或荧光染料，作为一种载体，将货物导向特定的细胞群。虽然用于标记或“结合”抗体的方法已经建立了很长时间，但这些传统方法存在局限性，影响抗体在测定和药物递送中的性能。

图1所示。传统的抗体标记方法:注意非位点特异性标记方法，使用nhs -酯化学基团，将货物(绿色)随机附着在抗体上。右边的图表显示了每个抗体的标签数量是如何高度可变的，从而产生异质混合的产物。这可以显著降低抗体性能。

用货物或其他功能分子标记抗体可以通过各种化学方法来完成，这些方法将这些分子与天然存在于抗体表面的特定氨基酸联系起来。然而，这些常见的标记方法不是“位点特异性”的，这意味着货物分子随机附着在抗体上，包括抗体结合区域附近甚至抗体结合区域内的位点(图1)。这可能会干扰抗体与靶标的结合，导致抗体偶联物的异质性混合。非位点特异性标记的最终结果是较低的分析敏感性和特异性。

我们的研官方manbetx手机版究提出了一种新的结合抗体的方法，利用光反应性连接分子定位特异性和均匀结合抗体的fc常数区，极大地提高了抗体的结合能力和性能。这些小的连接分子被称为光反应性抗体结合域(pAbBD)或商品名oYo-Link^TM(AlphaThera LLC)。pabbd要么以融合蛋白的形式表达，要么通过c端独特的反应性化学处理产生，从而精确地附着所需的货物。当暴露在365 nm的“黑”光下时，这些连接分子将共价地附着在几乎任何现有的“现成”抗体的fc区域上。因此，连接体携带货物，结果是带有所需分子标记的抗体。整个抗体标记过程可以在30秒的动手时间内在2小时内完成(图2)。

图2所示。使用光反应性抗体结合域连接子标记位点特异性抗体:y形抗体分子在光反应性抗体结合域连接子和365 nm“黑”光照射的帮助下与两个货物分子结合。货物显示为绿色圆圈，连接分子已被连接。通过位点特异性标记，连接器将货物引导到抗体的fc常数区域。如图所示，最多可以添加两个货物标签。右边的图表显示了标记抗体的高度均匀的混合物。

我们的方法的另一个显著特点是它具有广泛的兼容性，具有广泛的pH范围和缓冲条件，这是传统的非特异性化学标记方法无法实现的。这减少了优化或净化的需要，使标签“即插即用”。这种位点特异性标记方法的结果是均相抗体偶联物的产量，为利用抗体的广泛应用提供了改进的控制和分析性能。这包括需要将抗体固定在表面上的检测，因此位点特异性标记可以确保这些表面上正确的抗体定向，并显着提高检测灵敏度。我们设想光反应性抗体结合结构域将广泛用于改善各种抗体应用。

Andrew Tsourkas, James Hui, Joseph Iwasyk
美国宾夕法尼亚大学

出版

LASIC:天然igg的光激活位点特异性偶联
James Z Hui, Shereen Tamsen, Yang Song, Andrew Tsourkas
生物偶联化学2015年8月19日

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